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微生物培养基制备要求

作者:乐诊生物技术发布时间:2023-03-17 15:15:01浏览量:0

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微生物培养基制备要求

  培养基配制的质量将直接影响微生物的生长。由于各种微生物的营养要求和培养目的不同,对各种培养基的制备要求如下:

  1. 根据培养基配方的组成称量,溶于蒸馏水中。使用前,应检查所使用试剂和药品的质量。

  2. PH值测量和调整:PH值测量应在培养基冷至室温时进行。由于热、冷条件下pH值存在一定差异,测量完成后,按计算量加碱或酸并混合均匀,然后再次测试。培养基的pH值必须准确,否则可能影响微生物的生长或影响结果的观察。但需要注意的是,高压灭菌会影响某些培养基pH值的降低或升高,因此不建议灭菌压力过高或次数过多,以免影响培养基质量。指示剂、脱氧胆酸钠、琼脂等一般在调整pH后加入。

  3.培养基应保持清洁,以便观察细菌生长情况。培养基加热煮沸后,可用脱脂棉或绒布过滤去除沉淀物。如有必要,可用蛋清澄清。使用的琼脂条在使用前应事先清洗和干燥,以避免因琼脂中的杂质而影响透明度。

  4. 铁和铜等容器不能用来盛放培养基。最好使用水洗过的中性硬玻璃容器。

  5. 培养基的杀菌不仅要达到完全杀菌的目的,还要注意不要因为加热而降低其营养价值。一般121℃15分钟就足够了。如果培养基中含有不耐高温的物质,如糖、血清、明胶等,应采用低温杀菌或间歇法杀菌。一些不能加热的试剂,如溴酸钾、蛋黄、TTC、抗生素等,应在基础琼脂高压杀菌后冷却至50℃左右再加入。

  6. 每批培养基配制完成后,应进行无菌生长试验和被测菌株的生长试验。如果是生化培养基,用标准菌株接种,观察生化反应结果。反应应该正常。培养基不能存放太久。必要时可存放在4℃冰箱中。

  7. 目前干培养基种类繁多,每批都需要一个标准菌株进行生长测试或生化反应观察。各种培养基只有在相应的应变生长试验良好后才能使用。新购买或储存的干培养基在制备时还应测试pH值,并应按产品说明书中的剂量和方法使用。

  8. 对配制的每一批培养基都应做好记录,包括所用化学试剂、灭菌条件、菌株生长试验结果、生产人员等,以备备查。

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